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土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法

簡(jiǎn)要描述:土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法本生本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器等。

  • 產(chǎn)品型號:BC0860 50T/24S
  • 產(chǎn)       地:天津市
  • 更新時(shí)間:2023-02-21
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:2612
詳細介紹
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級別其他

  土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法 天津本生

  中文名稱(chēng):土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒

  儲存條件2-8℃

  單位盒

  有效期6個(gè)月

  英文名稱(chēng)Soil Acid Protease Activity Assay Kit

  檢測方法可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer

  規格50T/24S

  產(chǎn)品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶?jì)润w積是否一致,有疑問(wèn)請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

  試劑名稱(chēng) 規格 保存條件

  試劑一 液體 20 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑二 粉劑×1 瓶 2-8°C保存

  試劑三 液體 12 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑四 液體 40 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑五 液體 10 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑六 液體 15 mL×1 瓶 2-8°C保存

  標準品 液體 1 mL×1 支 2-8°C保存

  溶液的配制:

  1、 試劑二:臨用前加入 10 mL 試劑六,沸水浴攪拌溶解后待用,用不完的試劑 2-8°C保存 1 個(gè)月。

  2、 標準品:20μmol/mL 酪AN酸溶液。

  產(chǎn)品說(shuō)明:

  土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機化合物的轉化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。土壤酸性蛋白酶在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。酸性條件下,土壤酸性蛋白酶可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪AN酸;在堿性條件下,酪an酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍,在680nm有特征吸收峰。

  Casein Tyrosine Phosphomolybdic acid + Tyrosine Tungsten blue 680nm

  注意:實(shí)驗之前建議選擇 2-3 個(gè)預期差異大的樣本做預實(shí)驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者

  增加樣本量進(jìn)行檢測。

  需自備的儀器和用品:

  可見(jiàn)分光光度計、水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、臺式離心機、研缽、蒸餾水、30-50

  目篩。

  操作步驟:

  一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)新鮮土樣自然風(fēng)干或 37°C烘箱風(fēng)干,過(guò) 30~50 目篩。

  二、測定步驟

  Soil acid protease,H+OH-

  1、 分光光度計預熱30min 以上,調節波長(cháng)至680nm,蒸餾水調零。

  2、 標準溶液的稀釋?zhuān)喝?0μL 20μmol/mL酪an酸標準液,加入990μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.2μmol/mL標準液使用,現用現配。(實(shí)驗中每管需要220μL,為減小實(shí)驗誤差,故配制大體積。)

  3、 樣本測定

  試劑名稱(chēng) 測定管 對照管 標準管 空白管

  風(fēng)干土樣(g) 0.1 0.1 - -

  試劑一(μL) 200 200 - -

  試劑二(μL) 100 - -

  充分混勻后,37°C水浴/恒溫培養箱中反應24h,期間振蕩5-6 次,

  使土樣與反應液充分接觸。 - -

  試劑三(μL) 200 200 - -

  試劑二(μL) - 100 - -

  混勻,10000rpm 室溫離心10min,取上清液待測 - -上清液(μL) 220 220 - -

  0.2μmol/mL標準液(μL) - - 220 -

  蒸餾水(μL) - - - 220

  試劑四(μL) 650 650 650 650

  試劑五(μL) 130 130 130 130

  混勻,40°C水浴或恒溫培養箱培養 10min,10000rpm 室溫離心 10min,取上清液于 680nm 下讀取各管吸光值 A,分別記為 A 測定管、A 對照管、A 標準管、A 空白管,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管,ΔA標準=A 標準管-A 空白管。(標準管、空白管只需測 1-2 次,每個(gè)測定管需設一個(gè)對照管)

  三、土壤酸性蛋白酶活性計算

  單位定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol的酪an酸為一個(gè)土壤酸性蛋白酶活力單位。

  土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)=C標準×ΔA測定÷ΔA標準×V反總÷W÷T=0.1×ΔA測定÷ΔA標準÷W

  C標準:標準管濃度,0.2μmol/mL;V反總:反應體系總體積,0.5mL;T:反應時(shí)間,1d;W:樣本質(zhì)量,g。

  注意事項:

  當吸光值大于1時(shí),建議將上清液用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測定,計算時(shí)注意乘以稀釋倍數。

  實(shí)驗實(shí)例:

  1、 分別稱(chēng)取 2 份 0.1g 土樣于 1.5mLEP 管中,分別為對照管及測定管。按照測定步驟操作,使用 1mL 玻璃比色皿 測 定 吸 光 度 , 計 算 ΔA 測 定 =A 測 定 管 -A 對 照 管 =0.206-0.178=0.028 , ΔA 標 準 =A 標 準 管 -A 空 白 管=0.540-0.028=0.512,按土壤質(zhì)量計算酶活得:

  土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.1×ΔA 測定÷ΔA 標準÷W= 0.1×0.028÷0.512÷0.1= 0.0547U/g 土樣。

  2、 分別稱(chēng)取 2 份 0.1g 三葉草土樣于 1.5mLEP 管中,分別為對照管及測定管。按照測定步驟操作,使用 1mL 玻璃比色皿測定吸光度,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管=0.831-0.612=0.219,ΔA 標準=A 標準管-A 空白管=0.540-0.028=0.512,按土壤質(zhì)量計算酶活得:

  土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.1×ΔA 測定÷ΔA 標準÷W= 0.1×0.219÷0.512÷0.1=0.0313 U/g 土樣。

  相關(guān)系列產(chǎn)品:

  BC0880/BC0885 土壤堿性蛋白酶(S-ALPT)活性檢測試劑盒

  測定意義:土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機化合物的轉化,其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ACPT 在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解,與土壤有機質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。

  測定原理:酸性條件下,S-ACPT 可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪an酸;在堿性條件下,酪an酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;在680nm 有特征吸收峰。

  所需儀器及設備:可見(jiàn)分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水。

  備注:

  以上數據均來(lái)自公開(kāi)文獻, 暫未進(jìn)行獨立驗證, 僅供參考。

  土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法 本生生物公司供應:熒光定量PCR耗材,細胞培養類(lèi),核酸提取耗材,試劑包裝類(lèi),生物試劑,色素,原料,抗原抗體,試劑盒等,通用耗材包括深孔板、96孔硅膠墊、吸頭、封板膜、玻片、試管、量杯、試劑槽、離心管、移液器等。


 


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